Видео. Использование проточного цитометра с визуализацией Amnis в вирусологии, Amnis FlowSight, Luminex, англ., 2020 г.

Проточный цитометр CellStream, Luminex — компактная система, обладающая высокой чувствительностью и гибкостью для мультипараметрического анализа клеток и субмикронных частиц:

• до 7 неколлинеарных лазеров,
• до 20 флуоресцентных каналов,
• возможность визуальной верификации результатов.

Уникальная система детекции сигнала Amnis, используемая в цитометрах CellStream, обеспечивает высокую чувствительность, до 10 раз превышающую чувствительность фотоумножителей (PMT, photomultiplier tube) традиционных систем проточной цитометрии. CCD камера с большой скоростью захватывает усиленные с помощью технологии TDI (time delay integration, накопление сигнала во времени) изображения низкого разрешения и трансформирует их в высокоинформативные данные по интенсивности. В результате исследователь получает данные по интенсивности, привычные для традиционной проточной цитометрии, но с большей чувствительностью флуоресценции.

В отличие от традиционных систем на базе PMT, проточный цитометр CellStream регистрирует изображения, что дает возможность анализировать морфологические параметры и обеспечивает визуализацию всех событий, а следовательно, и простую верификацию выделения популяций, отделения одиночных событий от агрегатов и т.д.

Уникальные возможности CellStream:

• запатентованная камера с уникальной технологией TDI для проточных цитометров Amnis;
• визуальное подтверждение результатов;
• высокие чувствительность и разрешение;
• анализ морфологических параметров: площадь, соотношение сторон, значение интенсивности самого яркого пикселя — наряду с данными по общей интенсивности;
• детекция и разделение субмикронных частиц;
• автоматические очистка и калибровка;
• автосэмплер для 96-луночного планшета уже в базовой комплектации;
• валидация по стандартам GMP.

Технические характеристики

• Максимально 7 лазеров, нм — 375, 405, 488, 532, 561, 642, 730 нм;
• мощность лазеров: 375 нм — 70 мВт, 405 нм — 175 мВт, 488 нм — 200 мВт, 532 нм — 150 мВт, 561 нм — 150 мВт, 642 нм — 150 мВт, 730 нм — 40 мВт;
• каналы детекции – FSC¹, SSC², до 20 флуоресцентных;
• чувствительность MESF³ — <10 FITC, <5 PE;
• разрешение по параметрам светорассеяния — FSC < 300 нм, SSC < 200 нм;
• коэффициент вариации (CV) — < 3% (определен по ядрам эритроцитов курицы);
• формат загрузки — 1 пробирка или 96-луночный планшет;
• скорость потока — 3.66 / 14.64 мкл/мин;
• скорость сбора данных — до 20 000 клеток/сек;
• метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
• габариты, Ш × Г × В — 440 × 625 × 495 мм.
  

¹ FSC, forward scatter — прямое светорассеивание.
² SSC, side scatter — боковое светорассеивание.
³ MESF, molecules of equivalent soluble fluorochrome — число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.

Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке.

Системы ImageStreamX MKII и FlowSight обеспечивают анализ большого количества изображений каждой клетки в потоке, включая светлопольный и темнопольный каналы (SSC) и до 10 флуоресцентных каналов на высокой скорости.

Комбинирование скорости, чувствительности и фенотипических возможностей проточной цитометрии с одной стороны и детализации изображений и функциональных возможностей
микроскопии с другой стороны, позволяют визуализирующим проточным цитометрам ImageStream и FlowSight обойти ограничения обоих методов и открывают двери для широкого
спектра новых приложений.

Цитометры FlowSight и ImageStreamX функционируют как обычные проточные цитометры, но также обеспечивают анализ изображений каждой клетки. Мощное и интуитивно понятное программное обеспечение позволяет беспрепятственно связывать количественные данные
с изображениями:

• нажмите на точку в любом плоте данных, чтобы увидеть соответствующее изображение;
• кликните на интервал на любой гистограмме, чтобы увидеть каждую клетку в этом интервале;
• нарисуйте гейты на дот-плотах и вы увидите результирующие популяции клеток для валидации результатов.

Иннновационная технология цитометров Amnis увеличивает сигнал и уменьшает шум, обеспечивая беспрецедентную фотонную чувствительность. Детали конфигурации, такие как специальный боковой скаттер-лазер, регулируемая интенсивность лазерного излучения и анализ светлопольных изображений для прямого анализа клеток позволяют системе более эффективно разделять клеточные популяции, чем при использовании более дорогих проточных цитометров. Простота в использовании, выдающаяся производительность и анализ изображений каждой клетки отвечают потребностям как новичков, так и экспертов в области проточной цитометрии.

• Применим в любой научно-исследовательской дисциплине;
• детекция с использованием высокочувствительной камеры Hamamatsu, что позволяет драматически улучшить разрешение по отношению к традиционным проточным цитометрам;
• сконфигурирован для задач лабораторий любого фокуса и бюджета;
• характеризует популяции практически по любому визуальному или флуоресцентному параметру;
• лазеры — до 4-х:
• стандартно — 488 нм;
• опция — 405, 561, 642 нм;
• до 12 каналов детекции;
• опциональный автосэмплер для 96-луночных планшетов;
• увеличение 20Х (стандарт).

Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке. Системы ImageStreamX MKII и FlowSight обеспечивают анализ большого количества изображений каждой клетки в потоке, включая светлопольный и темнопольный каналы (SSC) и до 10 флуоресцентных каналов на высокой скорости.

Комбинирование скорости, чувствительности и фенотипических возможностей проточной цитометрии с одной стороны и детализации изображений и функциональных возможностей
микроскопии с другой стороны, позволяют визуализирующим проточным цитометрам ImageStream и FlowSight обойти ограничения обоих методов и открывают двери для широкого
спектра новых приложений.

Цитометры FlowSight и ImageStreamX функционируют как обычные проточные цитометры, но также обеспечивают анализ изображений каждой клетки. Мощное и интуитивно понятное программное обеспечение позволяет беспрепятственно связывать количественные данные с изображениями:

• нажмите на точку в любом плоте данных, чтобы увидеть соответствующее изображение;
• кликните на интервал на любой гистограмме, чтобы увидеть каждую клетку в этом интервале;
• нарисуйте гейты на дот-плотах и вы увидите результирующие популяции клеток для валидации результатов.

Иннновационная технология цитометров Amnis увеличивает сигнал и уменьшает шум обеспечивая беспрецедентную фотонную чувствительность. Детали конфигурации, такие как специальный боковой скаттер-лазер, регулируемая интенсивность лазерного излучения и анализ светлопольных изображений для прямого анализа клеток позволяют системе более эффективно разделять клеточные популяции, чем при использовании более дорогих проточных цитометров. Простота в использовании, выдающаяся производительность и анализ изображений каждой клетки отвечают потребностям как новичков, так и экспертов в области проточной цитометрии.

• Анализирует тысячи клеток в секунду при 60X увеличении;
• простой пользовательский интерфейс с графиками и гейтированием в режиме реального времени;
• система может быть сконфигурирована с любым числом лазеров — от одного до семи;
• изменение увеличения микроскопа позволяет осуществлять анализ изображений как мелких частиц, так и очень больших клеток или даже их конгломератов.

Технические характеристики

• Лазеры – до 7:
• стандартно 488 нм;
• опция 375, 405, 561, 592, 642, 730 нм;
• стандартно 6 каналов флуоресценции высокого разрешения (до 12 каналов опционально);
• увеличение 40Х (стандарт) и 20Х, 60Х (опция);
• опциональный автосэмплер для 96-луночных планшетов.