Этот продукт представляет собой набор, основные компоненты следующие: раствор — 2,5% дихромат калия, раствор B и раствор C смешиваются в равном объеме, чтобы получить раствор красителя гематоксилина железа Вейгерта, раствор D — фуксин кислоты Понсо, жидкость E — 1% раствора фосфорномолибденовой кислоты, а жидкость F представляет собой 2,5% раствор анилинового синего. После окрашивания срезов соединительной ткани трихромным раствором Массона коллагеновые волокна становятся от небесно-голубого до ярко-темно-синего цвета, мышечные волокна, цитоплазма, целлюлоза и ороговевший белый цвет становятся красными. пурпурно-красный, а эритроциты — светло-красные.
Протокол анализа
- Подготовка срезов: парафиновые срезы депарафинизируют водой; замороженные срезы, хранящиеся при температуре -20 °C, необходимо дать отстояться и вернуться к комнатной температуре;
- замочите ломтики в растворе Masson А при комнатной температуре на ночь (около 15 часов);
- замочите срезы в растворе Masson А и инкубируйте в духовке при температуре 65 °C в течение 30 мин. Промойте водопроводной водой в течение 30 с, пока желтый цвет на ткани не исчезнет. Одновременно добавьте жидкость Masson D и жидкость Masson F в духовку с температурой 65 °C для предварительного разогрева;
- смешать раствор Masson B и раствор Masson C в равных объемах (приготовленный для текущего использования, а не предварительно приготовленный и консервированный), нарезать на смешанный раствор и замочить на 1 минуту, затем промыть проточной водой;
- поместите срезы в 1%-ный раствор соляной кислоты (концентрированная соляная кислота: абсолютный этанол = 1:100) для дифференцировки примерно на 1 мин, пока ядро не станет серо-черным, а фон не станет почти бесцветным или светло-серым;
- промойте срезы водопроводной водой и слейте лишнюю воду. Опустите срезы в раствор Masson D на 6 минут. В это время ткани станут ярко-красными. Если красный цвет слишком светлый, время окрашивания можно продлить;
- слегка осушите срезы (не сухие) и погрузите их в раствор Masson E примерно на 1 минуту. Этот этап предназначен для дифференциации, пока волокна коллагена не станут светло-красными, а сами волокна не станут красными. Раствор Е можно регулировать в зависимости от степени окрашивания, обычно 1-2 мин;
- после того, как срез слегка осушен раствором Masson Е, без промывания водой, его непосредственно окрашивают раствором Masson F в течение 2-30 с в течение 30 с для костной ткани и 60 с для кожной ткани (в случае замороженных срезов), время окрашивания необходимо соответствующим образом сократить и отрегулировать в зависимости от степени окрашивания;
- срезы промывают и дифференцируют в трех последовательных резервуарах с 1% ледяной уксусной кислотой, в каждом резервуаре около 7 секунд. Цель состоит в том, чтобы дифференцировать избыток анилинового синего. Третий резервуар с 1% водным раствором ледяной уксусной кислоты промывают водой, чтобы избежать чрезмерной дифференциации синего цвета;
- срезы обезвоживают в трех последовательных цилиндрах с абсолютным этанолом в течение примерно 3, 5 и 5 с. Срезы прозрачны через ксилол в течение 5 мин и запечатываются нейтральной резинкой.
