Набор состоит из двух самых популярных красителей содержит пропидия йодид (PI) и Кальцеин АМ.
Пропидия йодид способен проникать и интегрироваться в двойную спираль ДНК внутри клетки, светится красным цветом и используется для окрашивания мертвых клеток или находящихся на стадии позднего апоптоза, поскольку способен проходить только через нарушенные оболочки клеток.
Кальцеин АМ проникает в живые клетки, обладая низкой токсичностью для них, почти не нарушает функции и структурные особенности клеток и органелл. Применим для работы с большинством эукариотических клеток, не используется при работе с клетками бактерий и грибов, потому что их клеточные мембраны для красителя непроницаемы. Светится зеленым цветом, который обеспечивается за счет гидролиза ацетоксиметилового эфира при взаимодействии с эстеразами внутри клеток. Так как в погибших клетках эстераз нет, их свечение не происходит.
Кальцеин АМ (ацетоксиметиловый эфир кальцеина) содержит группу ацетилметоксиметилового эфира (АМ), которая увеличивает гидрофобность, что позволяет ему с легкостью проходить сквозь мембранную оболочку живых клеток. При попадании внутрь способен расщепляться до кальцеина эндогенными клеточными эстеразами. С потерей AM-группы краситель больше не способен легко проникать сквозь оболочку и, таким образом, удерживается внутри клетки; этот зонд способен источать яркий зеленый свет при связывании с ионами кальция, находящимися внутри клеток. При некоторых условиях проведения экспериментов может излучать синий свет.
Комплект красителей оптимизирован и улучшен производителем для выполнения двойной окраски с помощью Кальцеина AM живых клеток и PI-маркировки мертвых клеток, что позволяет анализировать уровни жизнеспособности и состояния как живых, так и мертвых клеток.
